Zgjidhje diagnostikuese inovative për tuberkulozin dhe DR-TB nga #Macro & Micro-Test!

Një armë e re për diagnostikimin e tuberkulozit dhe zbulimin e rezistencës ndaj ilaçeve: Një sekuencim i synuar i gjeneratës së re (tNGS) i kombinuar me mësimin automatik për diagnostikimin e mbindjeshmërisë ndaj tuberkulozit

Raporti i literaturës: CCa: një model diagnostikues i bazuar në tNGS dhe të mësuarit automatik, i cili është i përshtatshëm për njerëzit me tuberkuloz dhe meningjit tuberkuloz më pak bakterial.

Titulli i tezës: Sekuencimi i gjeneratës së ardhshme i synuar për tuberkulozin dhe të mësuarit automatik: një strategji diagnostikuese ultra-sensitive për tubulat pulmonare paucifike dhe meningjitin tubular.

Periodikisht: 《Clinica Chimica Acta》

NËSE: 6.5

Data e publikimit: Janar 2024

Në bashkëpunim me Akademinë e Shkencave të Universitetit të Akademisë Kineze të Shkencave dhe Spitalin e Kraharorit të Pekinit të Universitetit Mjekësor të Kryeqytetit, Macro & Micro-Test krijoi një model diagnostikimi të tuberkulozit bazuar në gjeneratën e re të teknologjisë së sekuencimit të synuar (tNGS) dhe metodën e të mësuarit automatik, e cila siguroi ndjeshmëri ultra të lartë zbulimi për tuberkulozin me pak baktere dhe meningjit tuberkuloz, ofroi një metodë të re diagnostikimi të mbindjeshmërisë për diagnozën klinike të dy llojeve të tuberkulozit dhe ndihmoi në diagnozën e saktë, zbulimin e rezistencës ndaj ilaçeve dhe trajtimin e tuberkulozit. Në të njëjtën kohë, është zbuluar se ADN-ja cf e plazmës së pacientit mund të përdoret si një lloj mostre e përshtatshme për marrjen e mostrave klinike në diagnostikimin e TBM-së.

Në këtë studim, u përdorën 227 mostra plazme dhe mostra të lëngut cerebrospinal për të krijuar dy grupe klinike, në të cilat mostrat e grupit diagnostikues laboratorik u përdorën për të krijuar modelin e të mësuarit automatik të diagnozës së tuberkulozit, dhe mostrat e grupit diagnostikues klinik u përdorën për të verifikuar modelin diagnostikues të krijuar. Të gjitha mostrat u shënjestruan së pari nga një grup sondash kapëse të projektuara posaçërisht për Mycobacterium tuberculosis. Pastaj, bazuar në të dhënat e sekuencimit TB-tNGS, modeli i pemës së vendimeve përdoret për të kryer validim të kryqëzuar 5-fish në grupet e trajnimit dhe validimit të radhës diagnostikuese laboratorike, dhe merren pragjet diagnostikuese të mostrave të plazmës dhe mostrave të lëngut cerebrospinal. Pragu i marrë sillet në dy grupe testimi të radhës diagnostikuese klinike për zbulim, dhe performanca diagnostikuese e nxënësit vlerësohet nga kurba ROC. Së fundmi, u mor modeli i diagnozës së tuberkulozit.

Fig. 1 diagram skematik i dizajnit të hulumtimit

Rezultatet: Sipas pragjeve specifike të mostrës së ADN-së së Lëngut Cerebrospinal (AUC = 0.974) dhe mostrës së ADN-së cf të plazmës (AUC = 0.908) të përcaktuara në këtë studim, midis 227 mostrave, ndjeshmëria e mostrës së Lëngut Cerebrospinal ishte 97.01%, specifikiteti ishte 95.65%, dhe ndjeshmëria dhe specifikiteti i mostrës së plazmës ishin 82.61% dhe 86.36%. Në analizën e 44 mostrave të çiftëzuara të ADN-së cf të plazmës dhe ADN-së së lëngut cerebrospinal nga pacientët me TBM, strategjia diagnostikuese e këtij studimi ka një konsistencë të lartë prej 90.91% (40/44) në ADN-në cf të plazmës dhe ADN-në e lëngut cerebrospinal, dhe ndjeshmëria është 95.45% (42/44). Tek fëmijët me tuberkuloz pulmonar, strategjia diagnostikuese e këtij studimi është më e ndjeshme ndaj mostrave të plazmës sesa rezultatet e zbulimit Xpert të mostrave të lëngut gastrik nga të njëjtët pacientë (28.57% VS 15.38%).

Fig. 2 Performanca e analizës së modelit të diagnozës së tuberkulozit për mostrat e popullsisë

Fig. 3 Rezultatet diagnostikuese të mostrave të çiftëzuara

Përfundim: Në këtë studim u krijua një metodë diagnostikuese hipersensitive për tuberkulozin, e cila mund të ofrojë një mjet diagnostikues me ndjeshmërinë më të lartë të zbulimit për pacientët klinikë me tuberkuloz oligobacilar (kulturë negative). Zbulimi i tuberkulozit hipersensitiv bazuar në cfDNA-në plazmatike mund të jetë një lloj mostre e përshtatshme për diagnozën e tuberkulozit aktiv dhe meningjitit tuberkuloz (mostrat e plazmës janë më të lehta për t'u mbledhur sesa lëngu cerebrospinal për pacientët e dyshuar për tuberkuloz të trurit).

Lidhja origjinale: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/s0009898123004990? nëpërmjet%3Dihub

Prezantim i shkurtër i produkteve të serisë së zbulimit të tuberkulozit Macro & Micro-Test

Duke pasur parasysh situatën e ndërlikuar të mostrave të pacientëve me tuberkuloz dhe nevojat e ndryshme, Macro & Micro-Test ofron një set të plotë zgjidhjesh NGS për nxjerrjen e lëngëzimit nga mostrat e pështymës, ndërtimin dhe sekuencimin e bibliotekës Qualcomm, si dhe analizën e të dhënave. Produktet mbulojnë diagnostikimin e shpejtë të pacientëve me tuberkuloz, zbulimin e rezistencës ndaj ilaçeve të tuberkulozit, tipizimin e mycobacterium tuberculosis dhe NTM, diagnostikimin e mbindjeshmërisë së tuberkulozit baktere-negativ dhe personave me tuberkuloz, etj.

Kite zbulimi serial për tuberkulozin dhe mikobakteret:

Nr. i artikullit emri i produktit përmbajtja e testimit të produktit lloji i mostrës model i zbatueshëm
HWTS-3012 Agjent lirimi mostre Përdoret në trajtimin e lëngëzimit të mostrave të pështymës, ka marrë një numër regjistrimi të klasit të parë, Sutong Machinery Equipment 20230047. pështymë
HWTS-NGS-P00021 Kit zbulimi sasie Qualcomm për tuberkulozin hipersensitiv (metoda e kapjes së sondës) Zbulimi jo-invaziv (biopsi e lëngshme) i mbindjeshmërisë për tuberkulozin pulmonar bakter-negativ dhe nyjet e trurit; Mostrat e personave të dyshuar se ishin të infektuar me tuberkuloz ose mikobaktere jo-tuberkuloze u analizuan me anë të metagenomikës së sekuencimit me thellësi të lartë, dhe u dha informacioni i zbulimit nëse mikobakteret tuberkuloze ose jo-tuberkuloze ishin të infektuara dhe informacioni kryesor i rezistencës ndaj ilaçeve të linjës së parë të mikobakteriumit tuberkuloz. Gjak periferik, lëng lavazh alveolar, hidrotoraks dhe ascit, mostër e punksionit me fokus, lëng cerebrospinal. Gjenerata e dytë
HWTS-NGS-T001 Kit për tipizimin e mikobaktereve dhe zbulimin e rezistencës ndaj ilaçeve (metoda e sekuencimit të amplifikimit multipleks) Testi i tipizimit të Mycobacterium, duke përfshirë MTBC dhe 187 NTM;Zbulimi i rezistencës ndaj ilaçeve të Mycobacterium tuberculosis mbulon 13 ilaçe dhe 16 vende kryesore të mutacionit të gjeneve të rezistencës ndaj ilaçeve. Sputum, lëng lavazh alveolar, hidrotoraks dhe ascit, mostër e punksionit me fokus, lëng cerebrospinal. Platformë e dyfishtë e gjeneratës së dytë/të tretë

Pikat kryesore: Kit për tipizimin e mikobaktereve dhe zbulimin e rezistencës ndaj ilaçeve HWTS-NGS-T001 (metoda e amplifikimit multipleks)

Prezantimi i produktit

Produkti bazohet në barnat kryesore të linjës së parë dhe të dytë të përshkruara në udhëzimet e OBSH-së për trajtimin e tuberkulozit, makrolidet dhe aminoglikozidet që përdoren zakonisht në udhëzimet e trajtimit NTM, dhe vendet e rezistencës ndaj ilaçeve mbulojnë të gjithë grupin e vendeve të lidhura me rezistencën ndaj ilaçeve në katalogun e mutacioneve komplekse të Mycobacterium tuberculosis të OBSH-së, si dhe gjene të tjera të raportuara të rezistencës ndaj ilaçeve dhe vende mutacioni sipas hetimit dhe statistikave të literaturës me rezultate të larta brenda dhe jashtë vendit.

Identifikimi i tipizimit bazohet në llojet e NTM-së të përmbledhura në udhëzimet e NTM-së të botuara nga Revista Kineze e Tuberkulozit dhe Sëmundjeve Respiratore dhe me konsensusin e ekspertëve. Prajmerët e tipizimit të projektuar mund të amplifikojnë, renditin dhe shënojnë më shumë se 190 lloje NTM-sh.

Përmes teknologjisë së amplifikimit të PCR multipleks të synuar, gjenet e gjenotipizimit dhe gjenet rezistente ndaj ilaçeve të Mycobacterium u amplifikuan nga PCR multipleks, dhe u mor kombinimi i amplikonit të gjeneve të synuara që do të zbuloheshin. Produktet e amplifikuara mund të ndërtohen në biblioteka sekuencimi me rendiment të lartë të gjeneratës së dytë ose të tretë, dhe të gjitha platformat e sekuencimit të gjeneratës së dytë dhe të tretë mund t'i nënshtrohen sekuencimit me thellësi të lartë për të marrë informacionin e sekuencës së gjeneve të synuara. Duke krahasuar me mutacionet e njohura të përfshira në bazën e të dhënave të integruar të referencës (duke përfshirë katalogun e mutacioneve komplekse të Mycobacterium tuberculosis të OBSH-së dhe marrëdhënien e tij me rezistencën ndaj ilaçeve), u përcaktuan mutacionet që lidhen me rezistencën ndaj ilaçeve ose ndjeshmërinë ndaj ilaçeve anti-tuberkuloz. I kombinuar me tretësirën e trajtimit të mostrës së sputumit të hapur vetë të Macro & Micro-Test, problemi i efikasitetit të ulët të amplifikimit të acidit nukleik të mostrave klinike të sputumit (dhjetë herë më i lartë se ai i metodave tradicionale) u zgjidh, në mënyrë që zbulimi i sekuencimit të rezistencës ndaj ilaçeve të mund të aplikohet drejtpërdrejt në mostrat klinike të sputumit.

Diapazoni i zbulimit të produktit

34gjenet që lidhen me rezistencën ndaj ilaçeve18ilaçet kundër tuberkulozit dhe6U zbuluan droga NTM, duke mbuluar297vendet e rezistencës ndaj ilaçeve; Dhjetë lloje të Mycobacterium tuberculosis dhe më shumë se190U zbuluan lloje të NTM-ve.

Tabela 1: Informacion mbi 18+6 Barna +190+NTM

Avantazhi i produktit

Përshtatshmëri e fortë klinike: mostrat e pështymës mund të zbulohen direkt me agjent vetë-lëngëzimi pa kulturë.

Operacioni eksperimental është i thjeshtë: raundi i parë i operacionit të amplifikimit është i thjeshtë, dhe ndërtimi i bibliotekës përfundon në 3 orë, gjë që përmirëson efikasitetin e punës.

Tipizim gjithëpërfshirës dhe rezistenca ndaj ilaçeve: mbulimi i vendeve të tipizimit dhe rezistencës ndaj ilaçeve të MTB dhe NTM, të cilat janë pikat kryesore të shqetësimit klinik, tipizimi i saktë dhe zbulimi i rezistencës ndaj ilaçeve, mbështetja e softuerëve të pavarur të analizës dhe gjenerimi i raporteve të analizave me një klikim.

Pajtueshmëria: përputhshmëria e produktit, përshtatja me platformat kryesore ILM dhe MGI/ONT.

Specifikimi i produktit

Kodi i produktit emri i produktit Platforma e zbulimit specifikimet
HWTS-NGS-T001 Kit për tipizimin e mikobaktereve dhe zbulimin e rezistencës ndaj ilaçeve (metoda e amplifikimit të shumëfishtë) ONT, Illumina, MGI, Salus pro 16/96rxn

Koha e postimit: 23 janar 2024